技术要点
(一)
白蜡品种选择选用果形大,单果种子多,籽粒饱满,种仁
白蜡品质优良,适应性较强的优良品系,或单株坐果力强、经济效益优的多果型丰产品系。
(二)外植体材料的预处理及选择
1.外植体材料的预处理:栝楼品种块茎(带芽眼)于取材前
2个月埋人试验地塑料大棚内,待抽出匍匐茎后于取材3天前用1000倍的70%甲基托布津可湿性粉剂水溶液喷1次。剪取栝楼匍匐茎5~7厘米的茎顶,用2%洗衣粉洗去灰尘后在流水下冲洗20分钟,再用20%的84消毒液浸10分钟,无菌水冲洗3~4次。
2.无菌材料的获取:经预处理的材料在超净工作台上先用0.1%的升汞消毒10分钟,无菌水冲洗3~4次,再用无菌纸吸干水分,在超净台上剥取0.3~0.5毫米的茎尖,白蜡作为外植体进行组织白蜡培养。
(三)
白蜡培养基及
白蜡培养条件
1.
白蜡培养基:
诱导
白蜡培养基MS+6-BA1.5毫克/升+IBA0.3毫克/升NAA0.05毫克/升+20克/升蔗糖。增殖
白蜡培养基MS+6一BA1.0毫克/升十IBAO.3毫克/升AA0.05毫克/升+20克/升蔗糖。
生根白蜡培养基1/2MS+IBA0.5毫克/升+20克/升蔗糖各类白蜡培养基均按上述各种成分的量加入后,定容到1000毫升,将pH调到5.8,然后分装到玻璃瓶内,进行高温高压消毒。在21℃下20分钟后,灭菌完毕,取出备用。
2.
白蜡培养条件:
白蜡培养温度白天为25±2℃,夜间温度15±2℃,光照每天10~12小时,光照强度为2000~3500勒克斯。茎尖生长点在无菌室内接种到诱导
白蜡培养基上后,移人组织
白蜡培养室进行
白蜡培养,,继而出现分化出的芽丛。45天后将诱导出的栝楼芽丛转接到增殖
白蜡培养基上进行增殖
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